是否进口:否 | 产地:南京 | 分类:实验服务 |
品牌:南京瑞源生物 | 用途范围:科研实验 | 产品名称:酵母三杂交文库筛选及验证 |
是否危险化学品:否 | 级别:其它 |
服务简介
酵母三杂交技术是由酵母双杂交技术改进而来的,这套系统引进了一个 pBridge 的质粒,这个质粒的特点是能够同时插入两个外源蛋白,在 MCSI 插入的蛋白的 N 端仍然融合 Gal4 系统中的 BD 结合域氨基酸多肽片段,而在 MCSII 中插入的蛋白不融合任何标签,但是在其上游有一个 Pmet25 启动子,这个启动子的特点是只有在甲硫氨酸 (Met) 缺乏的时候才能工作,使下游蛋白基因表达,所以必须要在甲硫氨酸缺陷型培养基中进行实验。同样将 pBridge 质粒转化到 Y2HGold 菌株中。同时,将第三个蛋白基因克隆到 pGADT7 载体上,然后转化到 AH109 酵母菌株中,然后再将这两种菌进行小量结合,其余操作步骤跟酵母双杂交系统一致。的区别就是所有的缺陷型培养基都必须是甲硫氨酸缺陷型的基础上配置。如果这三个蛋白能够发生互作,则能够在五缺培养基 (SD/-Met/-Ade/-His/-Leu/-Trp)上生长。
技术优势
1、酵母三杂交系统操作简单,可用于细胞内核酸水平实验验证
2、酵母三杂由酵母双杂交技术发展而来,在研究蛋白质复合体、蛋白质修饰机制方面得到广泛应用
样本要求
样品类型 | 样品需求 | 保存条件(℃) | 运输条件 |
细胞样本 | 细胞数量大于 1*108 | -80 | 干冰 |
动物样本 | 大于 5 g | -80 | 干冰 |
植物样本 | 大于 5 g | -80 | 干冰 |
总 RNA | 大于 400 μg | -80 | 干冰 |
服务内容